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| 细胞学分析产品 |
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| 细胞信号转导产品 |
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| 蛋白激酶抑制物 |
豆蔻酰化蛋白激酶C多肽抑制物
InCELLect®
AKAP St-Ht31抑制肽
cAMP依赖的蛋白激酶多肽抑制物
MEK抑制物U0126
PD 98059
SB 203580
LY 294002 |
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| 蛋白激酶底物 |
肯普肽（PKA）肽底物
蛋白激酶C的突触后神经原特异性底物（28-34）（PKC）的肽底物
DNA 依赖的蛋白激酶肽底物
cdc2 蛋白激酶肽底物
cGMP依赖的蛋白激酶（PKG）肽底物
酪蛋白激酶I肽底物
酪蛋白激酶II肽底物 |
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| 蛋白磷酸酶检测 |
非放射性磷酸酶检测系统
丝氨酸/苏氨酸磷酸酶检测系统
酪氨酸磷酸酶检测系统 |
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
HaloTag™
pHT2 Vector
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20μg |
G8241 |
| HaloTag™
TMR Ligand，5mM |
30μl |
G8251 |
| HaloTag™
diAcFAM Ligand，10mM
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30μl |
G8271 |
| HaloTag™
Biotin Ligand，5mM
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30μl |
G8281 |
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描述：
HaloTag™可互换标记技术是一种新工具，它可用来使表达有HaloTag™蛋白或融合蛋白的活细胞、固定的哺乳动物细胞成像，也可用来分析标记的融合蛋白的翻译后修饰，以及分离融合蛋白和蛋白复合物。该技术是以报告蛋白与其配基之间形成高效的共价键为基础，报告蛋白设计独特，该技术可在活细胞、溶液或固相支持物上进行。
系统优势：
● 用一种结构实现多种应用：凭借使用不同功能基团的HaloTag™
配基，可以在不改变基因序列的情况下，实现成多种应用。
● 可使活细胞或固定细胞成像：配基可通过细胞膜，且共价键稳定，允许对活细胞或固定细胞成像。
● 融合蛋白的特异性标记：哺乳动物细胞无内源性的HaloTag?蛋白。HaloTag™
配基以高特异性和高亲和力与HaloTag™蛋白或融合蛋白结合。
● 可实现“脉冲-追踪”样标记：可使用多种荧光标记配基，实时监测蛋白表达。
● 快速的从细胞到凝胶分析：强的共价键允许细胞被成像、裂解及在SDS
凝胶上分析融合蛋白。
操作手册：TM260
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
DPPIV-Glo™
Protease
Assay
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10ml
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G8350 |
| 50ml
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G8351 |
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描述：
DPPIV- Glo™
蛋白酶分析是一种均质的发光分析系统，可用来测定二肽酶IV（DPPIV）的活性。DPPIV是一种丝氨酸蛋白酶，可以将倒数第二个位置上为L－脯氨酸或L－丙氨酸的多肽链的N端二肽切下。DPPIV-Glo™蛋白酶分析系统提供一个溶于缓冲液的前发光DPPIV底物－Gly-Pro-aminoluciferin，该缓冲液已被优化，用于检测DPPIV和萤光素酶活性。在“加样－混和－测量”的模式下，加入DPPIV-Glo™试剂，DPPIV底物裂解产生光型的光信号。在这均质、耦联的酶反应模式中，信号强度与DPPIV
活性高低呈正比。
DPPIV- Glo™蛋白酶分析的敏感性和与萤光分析的敏感性的比较。将重组DPPIV系列稀释到96孔板中，用DPPIV-Glo™
Assay System或Gly-Pro-AMC
荧光底物检测DPPIV酶活性。40分钟之后，用BMG
FLUOstar光度计/萤光计进行发光和萤光检测。将信噪比对酶浓度作图。DPPIV的检测低限定义为信噪比大于3
(图中虚线)的DPPIV的量。40分钟后，生物发光分析显示的检测低限小于
1pg/ml,而荧光分析的检测低限则约为100
pg/ml。
系统优势：
● 操作简单：简单的均质模式使得分析易于自动化
● 更高的敏感性: 比以荧光为基础的DPPIV分析更为敏感。发光试剂避免了固有的荧光背景信号，提供了优良的信噪比。该系统对DPPIV浓度分析的线性范围超过3个数量级并可检测低至1pg/ml的DPPIV。
● 结果快速: 只要30分钟，就可以获得最大信号。
● 优秀的Z’因子值：在384孔板上使用
lng/ml的DPPIV，测定的Z’值为0.77。
● 易于批量处理：均质的模式可生成连续的信号，提供优良的稳定性，而且允许在一个较长时间内读取信号。
操作手册：TM339
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| SignaTECT®
cAMP-Dependent Protein
Kinase (PKA) Assay System |
96 次反应 |
V7480 |
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| SignaTECT®
Protein Kinase C (PKC)
Assay System |
96次反应 |
V7470 |
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| Signa TECT®
Protein Tyrosine Kinase
(PTK) Assay System |
96次反应 |
V6480 |
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| SignaTECT®
Calcium/Calmodulin-Dependent
Protein Kinase (CaM KⅡ)
Assay System |
96次反应 |
V8161 |
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| SignaTECT®
DNA-Dependent Protein
Kinase Assay System |
96次反应 |
V7870 |
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| Signa TECT®
cdc2 Protein Kinase Assay
System |
96次反应 |
V6430 |
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V7480的组分
1×600μl PKA生物素的短肽底物
1×600μl PKA检测5×缓冲液
1×600μl cAMP
1×600μl ATP
1×0.2ml BSA
2×700μl 终止缓冲液
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
V7470的组分
1×600μl PKC生物素的短肽底物
3×200μl PKC激活5×缓冲液
1×600μl PKC辅助激活5×缓冲液
1×600μl ATP
1×0.2ml BSA
1×600μl 对照5×缓冲液
2×700μl 终止液
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
V6480的组分
1×240μl PTK生物素的短肽底物1
1×240μl PTK生物素的短肽底物2
1×500μl PTK检测5×缓冲液
1×200μl PTK稀释酶的5×缓冲液
1×0.2ml BSA
1×100μl DTT
1×600μl ATP
2×700μl 终止液
1×400μl 三氯乙酸（TCA），43%
1×600μl TCA中和5×缓冲液
1×250μl 矾酸钠
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
V8161的组分
1×300μl CaM KⅡ 生物素的短肽底物
1×1ml CaM KⅡ反应5×缓冲液
1×500μl CaM KⅡ激活5×缓冲液
1×0.2ml BSA
1×600μl ATP
1×500μl CaM KⅡ对照5×缓冲液
2×700μl 终止液
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
V7870的组分
1×300μl DNA-PK 生物素的短肽底物
1×1ml DNA-PK 5×反应缓冲液
1×300μl DNA-PK激活缓冲液
1×0.2ml BSA
1×600μl ATP
1×300μl 对照缓冲液
2×700μl 终止缓冲液
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
V6430的组分
1×300μl cdc2 激酶生物素的短肽底物
1×750μl cdc2激酶检测5×缓冲液
1×0.2ml BSA
1×600μl ATP
1×0.5mg Olomoucine cdc2 蛋白激酶抑制物
2×700μl 终止液
1×96个样品 SAM2®生物素捕获膜
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| 描述：Promega的SignaTECT®
蛋白激酶检测系统包括一个专利技术的SAM2®
生物素捕获膜，这种膜在检测蛋白激酶方面比其它现有技术有显著的优越性。
SAM2® 膜的特点是结合容量大，特异性强，与用传统的P81磷酸纤维素方法捕获和测量相比，SAM2®
膜背景较低，信号杂音比值较高。由于SAM2®
膜打了洞，编了号，研究者可以测量1-96个激酶反应。Promega的SAM2®膜不需要其它激酶活性测量方法那么多的“上手操作”时间。激酶反应完成后，将样品点到SAM2®
膜上，用一系列简短的洗涤步骤来去除非特异标记。1小时内完成实验。另外，SAM2®
膜可用于各种不同的缓冲液/反应条件（例如：细胞提取物），而许多其它方法却不行。最后，高结合容量的特点使SignaTECT®
可用于动力学研究。
现有六个SignaTECT® 蛋白激酶检测系统：
cAMP依赖的蛋白激酶（PKA），DNA依赖的蛋白激酶（DNA-PK），蛋白激酶C（PKC），cdc2激酶，蛋白酪氨酸激酶（PTK）和钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaM
KⅡ）。每一系统都包含相应激酶的高特异性生物素的短肽底物和必要的反应组分。SignaTECT®
蛋白酪氨酸激酶系统含有两个专利的短肽底物。试剂和膜的含量足够测量96个激酶反应。研究者需自行提供[γ-32P]ATP。
操作手册
SignaTECT®
PTK 技术公告 #TB211
SignaTECT® cdc2
技术公告 #TB227
SignaTECT® PKA
技术公告 #TB241
SignaTECT® PKC
技术公告 #TB242
SignaTECT® DNA-PK
技术公告 #TB250
SignaTECT® CaM
KⅡ 技术公告 #TB279 |
TB211
TB227
TB241
TB242
TB250
TB279 |
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储存条件：除V7470外，所有SignaTECT®
系统储存于-20℃，从购买之日起产品稳定6个月。 储存 V7470
于 -70℃。
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| Promega
的SignaTECT® 蛋白激酶检测系统小结 |
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| SignaTECT®
蛋白激酶检测系统 |
目标底物 |
技术公告 |
灵敏性** |
| cAMP依赖的蛋白激酶（PKA） |
肯普肽：LRRAS*LG |
TB241 |
大约0.01 酪蛋白单位 |
| 蛋白激酶C（PKC） |
Neurogranin（28-43）
AAKIQAS*FRGHMARKK |
TB242 |
大约1ng（10fmol） |
| cdc2蛋白激酶 |
组蛋白H1-衍生肽：
PKT*PKKAKKL |
TB227 |
1单位cdc2蛋白激酶 |
| 蛋白酪氨酸激酶（PTK） |
两个新型肽，每一个肽有一个上有一个可磷酸化的酪氨酸残基 |
TB211 |
0.05单位的纯化EGFR |
| 钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶 |
从CaM KII的α亚基自磷酸化序列衍生的肽 |
TB279 |
2.5ng纯化的CaM KII |
| DNA依赖的蛋白激酶（DNA-PK） |
p53衍生肽底物 |
TB250 |
20单位的DNA依赖的蛋白激酶 |
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*表示磷酸化位点。
**灵敏性：在所陈述的酶水平，信号高于背景信号的两倍。
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| SignaTECT®蛋白激酶检测过程流程图。图示使用任一SignaTECT®蛋白激酶检测系统的准备、进行和分析蛋白激酶活性的操作步骤总揽。
使用SignaTECT® PKC蛋白激酶检测系统检测PKC活性。图A：PKC检测系统的灵敏性和线性。蛋白激酶C在0.1mg/ml的BSA和0.05%
Triton® X-100中被稀释12.5-到250-倍，如SignaTECT®
PKC蛋白激酶检测系统技术公告#TB242所述。图B：粗大鼠脑提取物如SignaTECT®
PKC蛋白激酶检测系统技术公告#TB242所述准备和检测。加入磷脂激活剂后活性提高了3倍，并被50μM豆蔻酰化的蛋白激酶（PKC）肽抑制物（目录号#V5691）
完全抑制。
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| SAM2®
Biotin Capture Membrane |
96 个样品 |
V2861 |
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| 7.6×10.9cm |
V7861 |
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描述：SAM2®
生物素捕获膜依赖生物素对链霉抗生物素的亲和性结合连有生物素的分子。SAM2®
膜的制造过程受专利保护，此膜上有高密度链霉抗生物素，根据所使用底物不同，在nmol/cm2范围内，快速、定量地结合底物。另外，经过优化后，膜上仅有少量的非特异性结合。我们提供有大张、预标号的、半切开的膜（大约10.5×15.0cm；
目录号#V2861），也有小的，没切开的膜（大约7.6×10.9cm；
目录号#V7861）。半切开的膜很容易分成96块单独部分，为需要高结合容量的小规模的实验而设计。没切开的膜可用作整张膜进行分析，也可以根据需要的大小切开。未切开膜可用多孔移液器处理样品。两种膜都可用磷酸成像分析、放射自显影或液闪计数来对结果进行定量。化学发光检测技术也被成功地应用于这些膜。现在不建议使用荧光法检测被捕获的分子。
特点
● 多功能：对连有生物素分子底物的分析可应用于不同的底物类型，而不需要优化每一底物对基质的结合能力。不需要更换分析技术，使用者就可以进行广泛大量样品的分析，因为现有两种形式膜，96-方块（半切开）和整块（未切开）的。
● 特异性：蛋白质变性和高盐洗脱的结合将膜的非特异性结合降到最低，却没有影响链霉抗生物素和生物素之间的高亲和力。
● 高信号-背景比：使用的严格漂洗条件帮助获得低背景计数。
● 线性结合：在高至nmol/cm2的范围内，膜与生物素底物的结合呈线性，可进行动力学研究。
● 强结合反应：在8个数量级的pH（pH2-10）范围内，膜都与生物素结合物保持结合，但结合会随温度、有机溶剂、离子或非离子洗涤剂（SDS、CHAPS、Triton®X-100、Tween®
20 和Tween® 80）和变性剂（5M盐酸胍和2M尿素）而改变。
● 快速：结合发生在1分钟内。
● 方便：与用放射性检测的酶检测相容。这种方法制造的膜曾显示允许进行化学荧光检测。
操作手册
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储存条件：在密封的箔袋中，-20℃保存。 |
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| SAM2®
96 生物素捕获板 |
96孔板 |
V7541 |
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| 5x 96孔板 |
V7542 |
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描述：SAM 2®
96 生物素捕获板是在微过滤板的96个孔上含有Promega的SAM2®
96 生物素捕获膜。这种膜因为其对链霉抗生物素强力亲和而结合连有生物素的分子。制造SAM2®
96 生物素捕获膜的专利技术可使膜过滤介质上具有高密度的链霉抗生物素，推动快速、定量地捕获联有生物素的底物。另外，经过优化，膜的非特异性结合很底。这种96孔板构型便于使用真空复合架或商品的平板洗涤器进行洗涤。平板制成时有一个透明的上端密封和一个不透明的底端密封，可加入液闪液使用微孔板液体液闪仪进行数据定量。
特点
● 多功能：不必进行每一个底物对基质结合的优化，就可以分析广泛围的联有生物素的底物。
● 定量结合：纳摩尔水平的生物素联接接底物/厘米2；SAM2®
96 生物素捕获板每孔捕获400pmol生物素，而其它公司提供的链霉抗生物素包被平板每孔结合约5
pmol的生物素。
● 高信号—背景比：采用的严谨洗涤条件得到非常低的背景计数。
● 快速：一分钟内结合。
● 线性结合：膜可以线性结合连有生物素的分子至nmol/cm2范围。可进行动力学研究。
● 优越的可重复性：平板内或平板间系数变化小于或等于15%。
● 方便：使用真空复合架或商品平板洗涤器洗涤容易。
操作手册
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储存条件：平板密封箔袋中-20℃保存。 |
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| PepTag®
Non-Radioactive PKC Assay |
120次反应 |
V5330 |
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| PepTag®
Non-Radioactive cAMP-Dependent
Protein Kinase Assay |
120次反应 |
V5340 |
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V5330的组分
1ⅹ650 μl PepTag®
PKC 5X 反应缓冲液
1ⅹ650 μl PFC激活剂5X溶液
1ⅹ0.5 μg 蛋白激酶C
1ⅹ650 μl PepTag®
C1 短肽
1ⅹ10 ml 凝胶稳定溶液
1ⅹ250 μl 短肽保护液
V5340的组分
1ⅹ650 μl PepTag®
PKA 5X 反应缓冲液
1ⅹ650 μl PKA激活剂5X溶液
1ⅹ2,500 u 依赖于cAMP的蛋白激酶，催化亚基
1ⅹ650 μl PepTag®
A1 肽
1ⅹ10 ml 凝胶稳定溶液
1ⅹ250 μl 肽保护溶液
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描述：PepTag®
非放射性蛋白激酶检测系统提供一种快速、灵敏，非放射性方法检测蛋白激酶C（PKC）或蛋白激酶A（PKA）的活性。PepTag®
检测法使用的底物是对PKC（PepTag®
C1 肽-PLSRTLSVAAK）和PKA（PepTag®-
A1肽-LRRASLG）高敏度特异的明亮的荧光肽。短肽的磷酸化使净带电从+1度成-1。这种净电量的改变使得磷酸化和非磷酸化的底物在中性pH的琼脂糖胶上快速分开。使用荧光检测，小于2ng的纯激酶可在2小时之内被检测。该系统既可检测半纯化样品，也可检测纯化的酶的激酶活性，是快速筛选层析组分、激酶激活剂和抑制剂的良好选择。除了检测组分以外，每一系统还含有做正对照用的纯化的激酶。
特点
● 非放射性：短肽底物的荧光标签促进了磷酸化反应的定量而不需使用放射性。
● 低背景：因为在激酶分析中使用的是系统提供的彩色短肽磷酸化底物，故样品中自然发生的其它底物的磷酸化不会被加进被检测的激酶活性中。
● 快速：经过电泳分离步骤就可快速确定磷酸化反应是否成功。
● 方便：光密度计，分光光度计，96孔板读数计或荧光计都可以进行磷酸化肽的定量。
应用
● 快速筛选有激酶活性的柱分离部分。
● 筛选激酶激活剂和抑制剂。
操作手册
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储存条件：于-70℃储存。
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| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| Ani-ACIVE®
CaM Kll pAb, Rabbit,(pT286) |
40μl |
V1111 |
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| MAPK Signaling |
| Anti-ACIVE®
MAPK pAb, Rabbit,(pTEpY) |
40μl |
V8031 |
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| Anti-ACIVE®
JNK pAb, Rabbit,(pTPpY) |
40μl |
V7931 |
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| 120μl V7932 Anti-ACIVE®
p38 pAb, Rabbit,(pTPpY) |
100μl |
V1211 |
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| Ani-ACIVE®
MAPK Family Sampler |
1 each |
V3281 |
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| Anti-pT183 MAPK pAb,Rabbit |
50μl |
V8081 |
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| Anti-ERK 1/2 pAb,Rabbit
|
40μl |
V1141 |
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| Ani-Phosphotyrosine
pAb |
200μg |
V2171 |
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| Secondary
Antibodies,Anti-ACIVE®
Qualified |
| Donkey Anti-Rabbit ,
IgG, (H+L)HRP |
60μl |
V7951 |
|
| Donkey Anti-Rabbit,
IgG, (H+L),AP |
60μl |
V7971 |
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| Conrol
Extracts |
| PC12 Cell Extracts,
Western Controls— Sorbitol/Untreated
|
10 blots |
V8100 |
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| PC12 Cell Extracts,
Western Controls— NGF/Untreated |
10 blots |
V8110 |
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