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产品名称: 目录号:
细胞学分析产品
细胞增殖和细胞毒性分析产品
细胞凋亡检测系统和试剂
Cell Titer-BlueTM 细胞活性检测 G8080, G8081, G8082
CellTiter-GloTM 萤光细胞活性检测 G7570 ,G7571,G7572,G7573
CellTiter 96® AQueous 单溶液细胞增殖分析(MTS)G3580,G3581, G3582
CellTiter 96® AQueous 非放射性细胞增殖检测(MTS)G5421,G5430, G5440
CellTiter 96® 非放射性细胞增殖检测(MTT)G4000, G4100
CytoTox 96® 非放射性细胞毒性分析 G1780
CytoTox-ONETM 均质细胞膜完整性检测 G7890, G7891

BacTiter-Glo™ 微生物细胞活性检测
 
Cell Titer-BlueTM 细胞活性检测
 
产品 包装 目录号 价格(元)
Cell Titer-BlueTM Cell Viabiliy Assay 20ml G8080  
100ml G8081  
10x100ml G8082  
 
描述:Cell Titer-BlueTM 细胞活性检测以均质、荧光的方法监控细胞活性。检测的基础是活性细胞能将一种氧化还原染料(刃天青)转化成一种荧光终产物(试卤灵)。由于非活性细胞很快丧失新陈代谢能力,故而不能生成荧光信号。均质的检测方法就是将产生信号的试剂直接加到含有血清的细胞培养基中,经过孵育,用96孔板荧光计或分光光度计来记录数据。

特点
省时:均质的,加样—孵育—测量方案减少了操作步骤。
可自行选择检测方案:系统可用于96-或384-孔板,数据可用荧光值(最好)或吸光值来记录。
同一个样品可进行一个以上的检测:这个系统可与其它检测方法,如检测细胞凋亡的Apo-ONE™ 均质caspase-3/7检测(目录号#G7790)混合使用。
耐用:CellTiter-BlueTM 检测有完美的Z’值,而且与其它刃天青检测相比,在孵育时间上有更多的灵活性。
安全:试剂一般对细胞无毒。在某些情况下可以延长孵育时间。不需液闪混合液,不需处理放射性废物(不像[3H]—胸腺嘧啶掺入检测)或有毒溶剂(如MTT四唑检测所需)。
方便适合任何通量:如果精确吸取,试剂的体积设计得足够加到96-或384-孔检测,也有适合高通量筛选需要的产品包装。

应用
● 细胞增殖
● 细胞毒性
● 调亡结果

操作手册


技术公告
TB317


储存条件:闭光存于-20℃。如果储存操作得当,产品12个月内稳定。
 
 
CellTiter-GloTM 萤光细胞活性检测
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CellTiter-GloTM Luminescent
Cell Viability Assay
10ml G7570  
10x10ml G7571  
100ml G7572  
10x100ml G7573  

 

G7570的组分
1ⅹ10 ml CellTiter-GloTM 缓冲液
1ⅹ1 瓶 CellTiter-GloTM 底物(冻干粉)

描述:CellTiter-GloTM 萤光细胞活性检测(а)是根据定量测定所存在的ATP数量来确定培养物中活性细胞数目的一种均质的方法,ATP是活性细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-GloTM 检测试剂盒是为多孔板方案而设计,所以用于自动化高通量筛选(HTS),细胞增殖和毒性分析都很理想。所谓均质检测步骤就是向在血清培养基上培养的细胞中直接加入单个试剂(CellTiter-GloTM 试剂)。不需要洗涤细胞、去掉培养基或多步加样操作。在384-孔板上,这个系统能检测到少至15个细胞/孔。均质的“加入-混合-测量”方案使得细胞裂解和产生的萤光信号与存在的ATP量成正比。而ATP量直接与培养物中的细胞数量成正比,这与以前的报告相附合。CellTiter-GloTM 检测产生一种“辉光型”的萤光信号,由萤火虫萤光素酶反应产生,它的半衰期一般大于5小时,而半衰期随细胞类型和所用培养基不同而有所不同。由于半衰期长,就不需要使用试剂进样器,从而可灵活地进行连续的或一批一批形式的多孔板处理。独特的均质配方避免了需要多个步骤的其它ATP测量方法可能引入的误差。

目录号#G7570包括在96孔板上进行100μl/孔的100孔检测所需底物或在384-孔板上进行25μl/孔的400孔检测的底物。

给目录号#G7571配备的每个小瓶底物足够进行100μl/孔的100孔检测或在384孔板上进行25μl/孔的400孔检测(总检测数为1000到4000)。

目录号#G7572包含的底物足够在96孔板上以100μl/孔做1000次检测或在384-孔板以25μl/孔做4000次检测。

为目录号#G7573提供的每小瓶底物足够96孔板上100μl/孔的1000孔检测或384-孔板上25μl/孔的4000次检测 (总检测数是10000到40000)。

特点
灵敏:在384孔板中可检测少至15个细胞/孔或在96孔板上检测50个细胞/孔。可在标准的比色和荧光分析检测的极限之下精确地测量细胞数。减少了每个检测所需的细胞数。
简单:均质“加样-混合-测量”方案极大地减少了类似检测所需的平板操作步骤。
快速:试剂加入10分钟就可记录数据。
灵活:可用于多种形式的多孔板操作。可用萤光发光计或CCD成像设备记录数据。
耐用:萤光信号很稳定,半衰期一般大于5小时,随细胞类型和培养基不同而有所不同,样品可进行批量处理。

操作手册

技术公告
TB288


储存条件:为长期保存,冻干粉CellTiter-GloTM 底物和CellTiter-GloTM 缓冲液应储存在-20℃。

(а)正在申请专利
 
 
CellTiter 96® AQueous 单溶液细胞增殖分析(MTS)
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay 200次检测 G3582  
1000次检测 G3580  
5000次检测 G3581  
仅供实验室使用
描述:CellTiter 96® AQueous 单溶液细胞增殖分析以比色方法确定在增殖、细胞毒性或化学灵敏性分析中的活性细胞数量。CellTiter 96® AQueous 单溶液试剂包含一种新型甲臢化合物[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)- 2H-tetrazolium,内盐;MTS]和一个电子偶联试剂(乙硫吩嗪,PES)。这种方便的“单溶液”配方是对以前的CellTiter 96® Aqueous 检测的改进,因为新试剂盒使用PMS作为电子偶联剂,而形成一个稳定的溶液。进行检测时,只需要将少量的CellTiter 96® Aqueous 单溶液试剂直接加入到培养孔中,孵育1-4小时,然后在96孔板读板仪上(1,2)490nm记录。在490nm吸收值测量的甲臢产物的量直接与培养物中活细胞的数量成正比。

如果您目前正在使用[3H]-胸腺嘧啶掺入检测,可在通常需加入放射性胸腺嘧啶的时刻加入CellTiter 96® AQueous 单溶液试剂作为替代。以前的生物检测数据比较了基于MTS的CellTiter 96® AQueous 检测法中[3H]-胸腺嘧啶的掺入情况,和原始的基于MTT的CellTiter®检测法,比较结果表明甲臢试剂可以替代[3H]-胸腺嘧啶掺入(2,3)。

特点
简单:“加入-孵育-测量”格式(仅加入一次试剂)可以设计均质的高通量筛选分析。
方便:试剂盒以单溶液形式提供,已过滤灭菌,可直接加入到检测平板(不像MTT)。
快速:在96-孔板中检测,无需洗涤或收获细胞。也不需要MTT分析所需要的多个溶解步骤。
非放射性:不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物(不像[3H]-胸腺嘧啶掺入检测)。
灵活:平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成(不像MTT)。

应用
● 细胞增殖
● 化学灵敏性
● 细胞毒性
● 细胞附着确定
● 趋化性
● 凋亡结果

操作手册

技术公告
TB245


储存条件:避光,-20℃储存。

参考文献
1. Berridge.M.V.and Tan,A.S(1993)Arch.Biochem.Biophys.303,474.
2. Cory,A.H.et al(1991)Cancer Commun.3.207.
3. Celliter 96® Non-Radioactive Cell Proliferation Assay Technical Bulletin #TB112,Promega Corporaion.

相关文章 (http://www.promega.com.cn/sars/2.htm)

 
 
CellTiter 96® AQueous 非放射性细胞增殖检测(MTS)
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CellTiter 96® AQueous Non-Radiotive Cell Proliferatim Assay 1000次检测 G5421  
5000次检测 G5430  
50000次检测 G5440  
单独提供
CellTiter 96® AQueous MTS Powder 1g G1111  
250mg G1112  
 
描述:CellTiter 96® AQueous 非放射性细胞增殖检测以比色法确定在细胞增殖、细胞毒性或化学灵敏性检测等实验中的活细胞数目。这个系统由一种新型甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),内盐;MTS]和一个电子偶联剂(吩嗪硫酸二甲酯)PMS组成。MTS被细胞生物还原成一种可溶于组织培养基的甲臢化合物(1)。这种甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上测量,而不需要另外作处理(2,3)。新陈代谢活跃的活细胞内的脱氢酶类将MTS转化成液态可溶的甲臢化合物。由490nm测量的吸收值所表示的甲臢产物的数量与培养物中活性细胞的数量成正比。

如果你目前正在使用[3H]-胸腺嘧啶掺入检测,使用MTS/PMS混合液可以替代[3H]-胸腺嘧啶检测。只要在通常加入放射性[3H]-胸腺嘧啶的时刻加入MTS/PMS混合物就行。比较使用CellTiter 96® Aqueous的检测和使用[3H]-胸腺嘧啶掺入的细胞增殖生物分析的数据,显示两者的结果相似。这与使用Promega原始的CellTiter 96® 检测(目录号#G4000)所进行的放射性掺入研究符合(4)。

CellTiter 96® MTS粉末是用比色法在细胞增殖,细胞毒性或化学灵敏性检测中确定活性细胞数目的一种新型甲臢化合物。它以粉末形式提供。

特点
易于使用:混合MTS和PMS溶液,加入到细胞中,孵育然后读取吸光度值。
快速:在96孔板中进行检测,不需洗涤或收获细胞。也不需要溶解步骤。因为MTS甲臢产物可溶解在组织培养基中。
非放射性:不需液闪混合液,不需处理放射性废物(不像[3H]-胸腺嘧啶)。
灵活:平板被读数后还可以放回温箱继续颜色反应(不像MTT)。
安全:不需要挥发性有机溶剂来溶解甲臢化合物(不像MTT)。

应用
● 细胞增殖
● 化学灵敏性
● 细胞贴附确定
● 细胞毒性
● 趋化性
● 凋亡结果

操作手册


技术公告
TB169


储存条件:为长期储存,MTS和PMS溶液应避光保存在-20℃。

参考文献
1. Barltrop,J.A. et al.(1991)Bioorg.& Med.Chem.Lett.1,611.
2. Cory,A.H.et al(1991)Cancer Commun.3,207.
3. Riss,T.L. and Moravec, R.A.(1992) Mol.Biol.Cell 3 (Suppl.).184a.
4. CellTiter 96® AQueous Non-Radiotive Cell Proliferation Assay Technical Bulletin, #TB112, Promega Corporation.
 
 
CellTiter 96® 非放射性细胞增殖检测(MTT)
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CellTiter 96® Non-radioactive Cell Proliferation Assay 1000次检测 G4000  
5000次检测 G4100  
 
描述:Promega的CellTiter 96® 检测试剂盒集合了几种高质量试剂提供快速和方便的方法确定在增殖,细胞毒性(1,2),细胞贴附(3,4),趋化性(5)和凋亡分析(6)中的活细胞数目。该系统是对Mosamann(7)所描述的MTT检测方法的改进。该系统对从前的技术所存在的问题进行了改进,包括:
1) 由于加入有机溶剂而造成的血清蛋白沉淀;
2) 酚红的干扰;
3) 由于甲臢晶体的不完全溶解而导致的灵敏度降低;
4) 颜色产物的稳定性。
CellTiter 96® 检测由向96孔板培养物中加入预混合的优化的颜料溶液开始,96孔板中一般包括不同浓度的生长因子或测试物质。经过4小时孵育,活细胞将颜料溶液中的MTT四唑组分转化成一种甲臢化合物。如果你现在正在使用[3H]-胸腺嘧啶掺入检测,颜料溶液可替换[3H]-胸腺嘧啶, 而在通常加入放射性[3H]-胸腺嘧啶的时刻加入颜料溶液。然后向培养孔中加入溶解/停止溶液使甲臢产物溶液,再在96孔平板读数仪上记录570nm吸收值。另外,在几个样品中直接比较[3H]-胸腺嘧啶掺入和甲臢化合物转化的数据, 表明在确定生长因子浓度的实验中,两种检测的差异小于5% (8)。

特点
灵敏:在96平板读数计上可检测少至1000细胞/每孔,比中性红检测法的灵敏度高。
使用多种细胞:可检测哺乳动物,植物和酵母细胞。
非放射性:不需液闪混合物,不需处理放射性废弃物。
快速:在96孔板上进行检测,不需要洗涤和收获细胞步骤,也不需要液闪计数。
灵活:两种操作方法,5小时的或过夜的。
方便:不需称量或混合颜料组分。

应用
● 细胞增殖
● 细胞贴附
● 细胞毒性
● 趋化性
● 细胞凋亡结果

操作手册

技术公告
TB112


储存条件:于-20℃储存颜料溶液,于室温储存溶解/停止溶液。

参考文献:
1、 Campling, B.G. et al. (1988) Leukemia Res.12.823.
2、 Ponsoda, X. et al. (1994) Toxic. In Vitro 8, 47.
3、 Klemke, R.L. et al. (1994) J. Cell Biol. 127,859.
4、 Prieto, A.L. et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90,10154.
5、 Shi, Y. et al. (1993) J. Immunol. Meth.164,149.
6、 Wong, G.H.W. and Goeddel, D.V.(1994) J. Immunol.152,1751.
7、 Mosmann, T. (1983) J. Immunol. Meth.65,55.
8、 Tada, H. et al. (1986) J. Immunol. Meth.93,157.
 
 
CytoTox 96® 非放射性细胞毒性分析
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CytoTox 96® Non-Radioactive Cytotoxicity Assay 1000次检测 G1780  
限实验室使用

G1780的组分
1ⅹ3 ml 裂解液,10X
1ⅹ65 ml 终止液
1ⅹ10 μl LDH 正对照
5ⅹ1.5 ml 底物混合物
1ⅹ65 ml 检测缓冲液

描述:CytoTox 96® 非放射性细胞毒性分析试剂盒以比色方法替代放射性细胞毒性分析。CytoTox 96® 分析试剂盒定量地测量乳酸脱氢酶(LDH)在细胞裂解后的释放量,释放方式与[51Cr]在放射性分析中的释放方式极为相似。乳酸脱氢酶是一种极为稳定的细胞质酶。释放出的乳酸脱氢酶存在于培养物上清中,可用酶联检测法30分钟测量。这种酶联分析导致四唑盐(INT)转化成红色甲臢化合物。颜色形成的量与裂解细胞的数目成正比。应用一个96-孔平板读数计收集可见光波长的吸收值数据。这个分析可用于测量在细胞介导的细胞毒性分析中细胞膜的完整性,这种情况下目标细胞被效应细胞裂解; 也可测量被细胞、病毒、蛋白质、化学物质等作用的目标细胞的裂解。应用四唑盐结合硫锌酰胺脱氢酶或其它电子受体确定LDH的方法已有好几年(1)。根据这一技术所进行的不同的测量天然细胞毒性的实验已有报导,并且表明这个技术与应用[51Cr]释放分析的方法所做的平行实验的结果完全相同(在实验误差之内)(2,3)。

特点

非放射性:不需要处理放射性废弃物或[51Cr]。
快速:实验前不需标记目标细胞。
易于使用:用标准96孔板读数计收集吸收值(可见光波长)数据。
多功能:可进行多种应用, 包括测量:1)细胞介导的细胞毒性;2)化学物质介导的细胞毒性;和3)总细胞数。
灵敏:可揭示早期、低水平的细胞膜损坏,这些损害经常不能被其它方法检测到。

应用
● 细胞毒性
● 化学灵敏性
● 总细胞数确定

操作手册
技术公告
TB163


储存条件:底物混合物和检测缓冲液储存于-20℃。再溶底物混合物可在-20℃存放6-8周,活性损失很小。储存LDH正对照,裂解液(10X)和终止液于4℃。如果储存与操作得当,这个产品从购买日起稳定至少6个月。

参考文献
1、 Nachlas,M.M. et al.(1960) Anal. Biochem.1,317.
2、 Korzeniewski, C. and Callewaert, D.M.(1983) J. Immunol. Meth.64,313.
3、 Decker, T. and Lohmann-Matthes, M.L(1983) J. Immunol. Meth.115,61.
 
 
CytoTox-ONETM 均质细胞膜完整性检测
 
产品 包装 目录号 价格(元)
CytoTox-ONETM Homogeneous Membrane Integrity Assay
200-800次检测 G7890  
1000-4000次检测 G7891  

描述:CytoTox-ONETM 均质膜完整性检测试剂盒以均质荧光检测方法估计多孔板中存在的非活性细胞数目。细胞活性最常用的定义是基于细胞膜的完整性。对细胞浆组分漏入周围培养的测量已被广泛接受为估计非活性细胞数目的一个有效的方法。CytoTox-ONETM 检测以荧光量快速测量乳酸脱氧氢酶(LDH)从损坏细胞中的泄露。LDH向培养基的泄露以10分钟的酶联检测测量,酶联反应使得试卤灵转化成一种荧光的试卤灵产物。产生的荧光量与96孔或384孔板中裂解的细胞量成正比。CytoTox-ONETM 试剂不损坏正常健康细胞;因此,测量泄露LDH的反应可直接以含有混合的活性细胞和损坏细胞的均质方式进行。

特点
快速:检测在细胞培养板上完成,不像其它LDH检测那样需要转移样品;平板孵育10分钟后读取,而经典LDH检测需要孵育30分钟以上。
方便:在单一的多孔板上进行,不需将细胞和上清液分离。因为不需要把样品转移至第二块平板,需要较少的塑料制品。
可自动化:去掉了样品转移步骤使得这个检测易于适应自动化操作平台。
灵活:如果需要, 可较长时间处理细胞。加入提供的终止液后好几个小时都可读数并保持好的信号。

应用
● 细胞毒性确定
● 细胞活性确定
● 总细胞数确定
● 确定凋亡结果

操作手册

技术公告
TB306


储存条件:避光存于-20℃。此产品如果储存和操作得当可稳定6个月。
 
 
BacTiter-Glo™ 微生物细胞活性检测
 
产品 包装 目录号 价格(元)
BacTiter-Glo™ Microbial Cell Viability Assay



10ml G8230  
10X10ml G8231  
100ml G8232  
10X100ml G8233  
限实验室使用


在96孔板上,每孔用BacTiter-Glo™试剂100ul,目录号G8230所含试剂够做100孔检测;目录号G8231,1,000孔检测;目录号G8232,1,000孔检测;目录号G8233,10,000孔检测。在384孔板上,每孔用BacTiter-Glo™试剂25ul,目录号G8230所含试剂够做400孔检测;目录号G8231,4,000孔检测;目录号G8232,4,000孔检测;目录号G8233,40,000孔检测。

描述:BacTiter-Glo™ 微生物细胞活性检测系统用均质的方法,依据对所存在的ATP的定量结果,确定培养物中活细胞的数目。ATP是具有代谢活性的细胞的指示物。BacTiter-Glo™ 的设计既可以用于单管检测,也可用于多孔板形式的高通量筛选(HTS)。均质的检测步骤意味着只需要直接向培养在培养基中的细菌细胞中加入一次试剂(BacTiter-Glo™ 试剂),然后测量萤光即可。不需要洗涤细胞,去除培养基,进行多次移液步骤等,减少了其它ATP测量方法由于需要多个步骤而可能带来的移液错误。独特的试剂配方既可裂解细菌细胞,又可产生萤光信号,并支持这种“加入,混合,测量”的均质检测格式。萤光信号与存在的ATP量成正比,而ATP与存在于培养基中的细胞数目直接成正比(图2)。BacTiter-Glo™ 试剂的基础有两点,其一是一种受专利保护的热稳定萤光素酶(Ultra-Glo™ 重组萤光素酶)的性质,其二是从细菌中提取 ATP的专利试剂配方。BacTiter-Glo™ 检测产生“辉光型” 萤光信号,由图3所示的萤光素酶反应产生,其信号半衰期随菌株和培养基而不同,一般超过30分钟。数据表明这个检测可用于不同的细菌,酵母和真菌。

特点
● 简化微生物检测:加入、混合、测量方案将操作步骤减少到少于其它类似的ATP检测的数目,不需进样器。
● 很快得到结果:加入、混合试剂5分钟之后就能记录数据。由于灵敏度高,可以更早地检测到生长。
● 提高灵敏度:可以从少至10个细菌细胞中测量到ATP。
● 自由选择形式:可用于各种多孔板,也可用于单管;可用萤光发光计,也可用CCD相机记录数据。
● 连续处理平板:“辉光型”萤光信号稳定,半衰期一般超过30分钟。

应用
● 检查抗微生物化合物活性。
● 筛选抗微生物化合物。
● 以更高的灵敏度和更宽的范围检查细菌生长。
● 快速定量细菌。
● 快速检测ATP。

操作手册


技术公告
中文技术公告


储存条件:要长期储存,冻干粉的BacTiter-Glo™ 底物和BacTiter-GloTM 缓冲液应储存在-20℃。未开封的BacTiter-Glo™ 底物和缓冲液在-20℃可稳定6个月。

过程概揽