|
体外转录
|
|
RiboMAX™ 大规模RNA生产系统
T7 RiboMAX™ 大规模RNA直达生产系统
Riboprobe® 组合系统
Riboprobe® 系统
Riboprobe® 系统组分及缓冲液
Ribo m7G帽子类似物
pGEM® 阳性表达对照模板
RNA 聚合酶
RNA标准
|
| |
| |
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| RiboMAX™ Large Scale RNA Production
System—SP6 |
一个系统 |
P1280 |
|
RiboMAX™ Large Scale RNA Production
System—T7
|
一个系统 |
P1300 |
|
|
|
| |
P1280的组分
1x10μl SP6线形对照DNA
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
1x1.25ml 无核酸酶水
1x120μl 酶混合物,SP6 RNA聚合酶
1x100μl rUTP
1x100μl rCTP
1x100μl rATP
1x100μl rGTP
1x1ml 醋酸钠,3.0M(pH5.2)
1x240μl SP6 转录缓冲液,5x
描述:RiboMAX™ 大规模RNA生产系统能产生毫克量的RNA。在1ml反应中,RiboMAX™
系统能稳定地产生2-5mg/ml RNA,大约是常规的RiboMAX™ 系统转录反应产生的RNA的10-到20-倍。RiboMAX™
系统反应与Riboprobe® 系统的区别有三方面:使用了HEPES (pH7.5)
缓冲液而不是Tris-HCl (pH7.9) 缓冲液;rNTP和镁离子浓度提高到既适于SP6也适于T7
RNA聚合酶的水平;反应还中加入了酵母无机焦磷酸酶。
用RiboMAX™ 系统合成的RNA在兔网织红细胞体外翻译系统中比常规方法合成的RNA表现更好。对翻译有抑制的组分的减少可能在其它需要生物活性RNA的应用中更有优势。由于RiboMAX™
系统生产大量的RNA,因此不建议用这些系统生产需要高特异活性的RNA探针。
特点
● 灵活:提供两个系统,一个与SP6 RNA聚合酶,另一个与T7 RNA聚合酶一起使用。
● 调整规模:反应可放大或缩小,以适应不同量的RNA生产需要。
● 高质量:合成提高的,适于翻译的RNA。
应用
● 为体外或体内翻译反应生产大量加帽或不加帽的转录子。
● 在体外合成tRNA,rRNA,RNA病毒基因组和RNA酶。
● 生产用于RNA剪切、RNA二级结构、反义RNA和RNA:蛋白质相互作用研究的底物。
● 为非哺乳动物细胞RNA干扰合成长RNA。
|
| |
操作手册 #编号
|
| 储存条件:存于-20℃。 |
|
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
T7 RiboMAX™ Express
Large Scale RNA Production System
|
一个系统 |
P1320 |
|
|
|
| |
|
P1320的组分
2x5μg pGGM® 直达阳性对着模板
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
1x1.25ml 无核酸酶水
1x100μl 酶混合物,T7 直达
1x1ml 醋酸钠,3.0M(pH5.2)
1x500μl RiboMAX?直达T7 2X缓冲液
描述:T7 RiboMAX™ 大规模RNA直达生产系统为在短时间内体外稳定表达毫克量RNA而设计。由于优化了酶混合物和转录缓冲液,30分钟内产量可达5-8.5mg/ml,而其它同类商品系统需要2-4小时。为了尽量减少移取液体的次数和误差,在2x转录缓冲液中就包括了所有四种rNTP。另外,系统还包含RQI无RNA酶的DNA酶,以在转录后除去质粒模板。
由于2x缓冲液和四种rNTP已经混合在一起,我们不建议用T7 RiboMAX™
直达系统合成需要加帽的RNA。如要合成加帽RNA,请订购常规的RiboMAX™
大规模RNA生产系统—T7(目录号#P1300)。
特点
● 快速:在30分钟内T7 RiboMAX™ 直达系统生产毫克量的RNA,而不象其它商业试剂盒需要2—4小时。
● 方便:四种rNTP和2x转录缓冲液已经混合好,这样减少了移液误差和2x转录缓冲液已经混合好。这样减少了移液误差和实验设置时间。
● 灵活:有效转录各种大小的DNA。可转录短到21bp的转录子。
应用
● 产生大量不加帽转录子,用于体外或体内翻译。
● 体外合成tRNA, rRNA, RNA病毒基因组及RNA酶。
● 生产用于研究RNA剪切、RNA二级结构、反义RNA和RNA:蛋白质相互作用的底物。
● 生产用于非哺乳动物细胞RNA干扰的RNA。
|
操作指南
|
| 储存条件:存于-20℃。 |
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
Riboprobe® Combination System—T3/T7
RNA Polymerase
|
一个系统 |
P1450 |
|
| Riboprobe® Combination System—SP6/T7
RNA Polymerase |
一个系统 |
P1460 |
|
|
|
| |
|
P1450的组分
1x500u T3 RNA聚合酶
1x500u T7 RNA聚合酶
1x5μg pGEM? 阳性正对照直达模板
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
2x50μl rATP
2x50μ l rCTP
2x50μl rUTP
2x100μl DTT
1x500μl 优化的5X转录缓冲液
2x1.25ml 无核酸酶水
描述:Riboprobe® 组合系统为以被克隆的DNA插入片段为模板,在体外制备高特异活性的单链RNA探针,或微克量的确定RNA转录子而设计。Riboprobe®
组合系统含有RNA聚合酶以及所有在体外进行转录反应所需要的试剂(除放射性同位素外),还含有RQ1无RNA酶的DNA酶(目录号M6101),以在转录后除去模板。
特点
● 灵活:从一个质粒构造,既可以合成所克隆DNA编码链,也可以合成其非编码链RNA。
● 特异:SP6, T7和T3 RNA聚合酶对启动子非常专一,可以通过质粒DNA模板几乎均一的RNA。
● 方便:含有T7, T3或SP6聚合酶所需的阳性对照DNA模板,还含有用于除去DNA模板的DNA酶I,和RNasin®
核酸酶抑制剂。
应用
● 生产高特异活性的RNA探针。
● 生产微克量的RNA转录子。
● 生产RNA加工底物。
● 生产反义RNA。
|
| |
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
Riboprobe® 系统-SP6
|
1个系统 |
P1420 |
|
| Riboprobe® 系统-T3 |
1个系统 |
P1430 |
|
| Riboprobe® 系统-T7 |
1个系统 |
P1440 |
|
|
|
| 实验室使用 |
|
P1420组分
1 x 500u SP6 RNA 聚合酶
1 x 5μg pGEM® 阳性表达对照模板
1 x 110u RQ1无RNase的DNase
1 x 2,500u 重组Rnasin® 核糖核酸酶抑制剂
1 x 50μl rATP
1 x 50μl rCTP
1 x 50μl rGTP
1 x 50μl rUTP
1 x 100μl DTT
1 x 500μl 转录优化5X缓冲液
1 x 1.25ml 无RNase的水
描述: Riboprobe® 系统用于以克隆的DNA插入片段为模板,用体外转录方法制备高特异性的单链RNA探针或微克级的RNA转录本。这些系统包含所有以DNA为模板进行体外转录所需要的成分(除了放射性同位素),以及用于转录后去除模板的RQ1无RNase的DNase
(Cat.#M6101)。
特点
●特异性:SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶对启动子极为专一,使用DNA作为模板可以制备均一的RNA。
●酶的选择:系统提供SP6 RNA 聚合酶,T7 RNA 聚合酶或T3 RNA 聚合酶。
●方便:包含用于SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶的阳性对照模板,去除模板的DNase
I及重组RNasin® 核糖核酸酶抑制剂。
应用
●高特异性RNA探针的制备。
●微克级RNA转录本的制备。
●RNA加工底物的制备。
●反义RNA的制备。
|
操作指南
|
| 储存条件:存于-20℃。 |
|
有关文章
RNA Analysis Notebook BR120
In vitro Transcription Brochure BR102
Neural Notes NN012, NN013, NN014
Promega Notes PN061, PN074
相关产品
RNA 聚合酶
RNA产品系统
|
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
浓度 |
数量 |
目录号 |
价格(元) |
| Riboprobe® 系统缓冲液 |
1套 |
—— |
1 |
P1121 |
|
每种单独包装的
rATP, rCTP, rGTP, rUTP
|
0.5ml |
10mM |
1 |
P1221 |
|
| 可分开提供 |
| RQ1无RNase的DNase |
1,000U |
1U/μl |
1-4
5-19
20+ |
M6101 |
|
| |
| |
| rATP |
0.5ml |
10mM |
1 |
P1132 |
|
| rCTP |
0.5ml |
10mM |
1 |
P1142 |
|
| rGTP |
0.5ml |
10mM |
1 |
P1152 |
|
| rUTP |
0.5ml |
10mM |
1 |
P1162 |
|
| DTT |
| 分子生物级 |
100μl |
100mM |
1 |
P1171 |
|
| 转录优化5X缓冲液 |
200μl |
—— |
1 |
P1181 |
|
| 无核酸酶的水 |
50 ml |
—— |
1-4 |
P1193 |
|
| (2 x 25 ml) |
—— |
5+ |
|
|
|
| 实验室使用 |
|
P1120组分
1 x 50μl rATP
1 x 50μl rCTP
1 x 50μl rGTP
1 x 50μl rUTP
1 x 200μl 转录优化5X缓冲液
1 x 100μl DTT
1 x 1.25ml 无Nuclease的水
描述:Riboprobe® 系统缓冲液是单独及组合的Riboprobe®
系统组分。也可以单独提供缓冲液。
RQ1无RNase的DNase用于从制备的RNA中去除模板DNA。当需要保持RNA的完整性时,有必要使用RQ1无RNase的DNase。产品经过质量检测以确保其中检测不到RNase活性。包含10X反应缓冲液及10X终止缓冲液。
rATP,rCTP,rGTP及rUTP包装于单独的试管中,适合与Riboprobe®
系统一起使用。rNTP储存于无核酸酶的水中。纯度经过HPLC分析验证。
特点
●提前测试:试剂经过其它Riboprobe® 系统组分rNTP经过体外转录反应的功能性测试。
●转录检验合格:试剂经过使用SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶的体外转录反应检验合格。
|
操作指南
|
|
储存条件:存于-20℃。
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
浓度 |
目录号 |
价格(元) |
Ribo m7G帽子类似物
|
10 A254单位 |
40 mM |
P1711 |
|
| 25 A254单位 |
40 mM |
P1712 |
|
|
|
| |
|
描述:Ribo m7G帽子类似物是经过修饰的具有(m7G(5’)G)结构的核糖核酸。甲基化的核糖核酸可以掺入到体外合成转录本的5’末端以刺激7-甲基鸟嘌呤5’帽子结构在大多数真核mRNA上形成。
特点
●提高翻译效率:提高许多基于网织红血球反应的翻译效率。
●高效:阻止RNA在细胞内降解。
●灵活:可用于Riboprobe® 系统或RiboMAX™大量RNA制备系统。
|
操作指南
储存条件:存于-20℃。
有关文章
Promega Notes PN074
相关产品
RiboMAX™大量RNA制备系统-SP6
RiboMAX™大量RNA制备系统-T7
Riboprobe® 组合系统
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
pGEM® 阳性表达对照模板
|
10μg
(2 x 5μg) |
P2561 |
|
|
|
| |
|
描述:pGEM® 阳性表达对照模板是通过用内切酶ScaI将pGEMEX®
载体线形化得到的。当使用Riboprobe®系统时,pGEM® 阳性表达对照模板可用于监测体外转录反应,
特点
●多种大小RNA:SP6 RNA 聚合酶产生1,787及2,566碱基的转录本, T7 RNA
聚合酶产生1,065及2,346碱基的转录本,及T3 RNA 聚合酶产生250及1,525碱基的转录本。
●灵活:可以与SP6,T7,或T3 RNA 聚合酶一同使用。
|
操作指南
|
|
储存条件:存于-20℃。
相关产品 页码
Riboprobe® 组合系统 134
Riboprobe® 系统 135
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
| T7 RNA 聚合酶 |
1000μ |
P2075 |
|
| 5000μ |
P2077 |
|
| 10000μ |
P4074 |
|
| T3 RNA 聚合酶 |
1000μ |
P2083 |
|
| 2500μ |
P4024 |
|
| SP6 RNA 聚合酶 |
1000μ |
P1085 |
|
| 5000μ |
P1081 |
|
| 2500μ |
P4084 |
|
|
|
| |
|
描述:T7,T3及SP6 RNA 聚合酶对与之结合的启动子序列表现出极强的特异性。只有T7,T3或SP6
DNA,或克隆于相应启动子下游的DNA可以作为模板用于T7,T3或SP6 RNA 聚合酶引导的RNA合成。
特点
●特异性:T7,T3或SP6 RNA 聚合酶对T7,T3或SP6启动子序列表现出极强的亲和性及特异性。
●高纯度:通过SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳测定,T7,T3或SP6 RNA 聚合酶的纯度>90%
。无可检测水平的RNase及DNase活性的污染(<1%)。
●使用灵活:可以掺入32P, 33P, 3H及35S核苷酸同位素。
●与5X反应缓冲液一同提供:提供100mM DTT及转录最适5X缓冲液:200mM Tris-HCl(PH
7.9 at 25 oC), 30mM MgCl2, 10mM spermidine, 50mM
NaCl。
|
|
|
| |
| 产品 |
包装 |
目录号 |
价格(元) |
RNA标准
|
50μl |
G3191 |
|
|
|
| 实验室使用。 |
|
描述:Promega公司的RNA标准适合于在乙醛或甲醛-琼脂糖凝胶上判断介于0.28-6.58kb的单链RNA的大小。RNA标准含有9条从特异模板体外合成的RNA阶梯。RNA标准不适合于进行定量分析。电泳后,可以通过溴乙啶染色观察RNA片段。
特点
●推荐的上样量:3μl [用甲醛/MOPs缓冲液制备并使用MOPs电泳缓冲液上样(1)。
●范围(碱基):281-6,583。
●条带数:9。
|
操作指南
|
|
储存条件:存于-70℃。
|