Promega Home Page
 
产品名称: 目录号:
 

体外转录

RiboMAX™ 大规模RNA生产系统
T7 RiboMAX™ 大规模RNA直达生产系统
Riboprobe® 组合系统
Riboprobe® 系统
Riboprobe® 系统组分及缓冲液
Ribo m7G帽子类似物
pGEM® 阳性表达对照模板
RNA 聚合酶
RNA标准

 
 
RiboMAX™ 大规模RNA生产系统
 
产品 包装 目录号 价格(元)
RiboMAX™ Large Scale RNA Production System—SP6 一个系统 P1280  
RiboMAX™ Large Scale RNA Production System—T7
一个系统 P1300  
 
P1280的组分
1x10μl SP6线形对照DNA
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
1x1.25ml 无核酸酶水
1x120μl 酶混合物,SP6 RNA聚合酶
1x100μl rUTP
1x100μl rCTP
1x100μl rATP
1x100μl rGTP
1x1ml 醋酸钠,3.0M(pH5.2)
1x240μl SP6 转录缓冲液,5x

描述:RiboMAX™ 大规模RNA生产系统能产生毫克量的RNA。在1ml反应中,RiboMAX™ 系统能稳定地产生2-5mg/ml RNA,大约是常规的RiboMAX™ 系统转录反应产生的RNA的10-到20-倍。RiboMAX™ 系统反应与Riboprobe® 系统的区别有三方面:使用了HEPES (pH7.5) 缓冲液而不是Tris-HCl (pH7.9) 缓冲液;rNTP和镁离子浓度提高到既适于SP6也适于T7 RNA聚合酶的水平;反应还中加入了酵母无机焦磷酸酶。

用RiboMAX™ 系统合成的RNA在兔网织红细胞体外翻译系统中比常规方法合成的RNA表现更好。对翻译有抑制的组分的减少可能在其它需要生物活性RNA的应用中更有优势。由于RiboMAX™ 系统生产大量的RNA,因此不建议用这些系统生产需要高特异活性的RNA探针。

特点
● 灵活:提供两个系统,一个与SP6 RNA聚合酶,另一个与T7 RNA聚合酶一起使用。
● 调整规模:反应可放大或缩小,以适应不同量的RNA生产需要。
● 高质量:合成提高的,适于翻译的RNA。

应用
● 为体外或体内翻译反应生产大量加帽或不加帽的转录子。
● 在体外合成tRNA,rRNA,RNA病毒基因组和RNA酶。
● 生产用于RNA剪切、RNA二级结构、反义RNA和RNA:蛋白质相互作用研究的底物。
● 为非哺乳动物细胞RNA干扰合成长RNA。

 
操作手册                                                                                        #编号

技术公告
#TB166

储存条件:存于-20℃。

 

 

T7 RiboMAX™ 大规模RNA直达生产系统
 
产品 包装 目录号 价格(元)
T7 RiboMAX™ Express
Large Scale RNA Production System
一个系统 P1320  
 

P1320的组分
2x5μg pGGM® 直达阳性对着模板
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
1x1.25ml 无核酸酶水
1x100μl 酶混合物,T7 直达
1x1ml 醋酸钠,3.0M(pH5.2)
1x500μl RiboMAX?直达T7 2X缓冲液

描述:T7 RiboMAX™ 大规模RNA直达生产系统为在短时间内体外稳定表达毫克量RNA而设计。由于优化了酶混合物和转录缓冲液,30分钟内产量可达5-8.5mg/ml,而其它同类商品系统需要2-4小时。为了尽量减少移取液体的次数和误差,在2x转录缓冲液中就包括了所有四种rNTP。另外,系统还包含RQI无RNA酶的DNA酶,以在转录后除去质粒模板。

由于2x缓冲液和四种rNTP已经混合在一起,我们不建议用T7 RiboMAX™ 直达系统合成需要加帽的RNA。如要合成加帽RNA,请订购常规的RiboMAX™ 大规模RNA生产系统—T7(目录号#P1300)。

特点
● 快速:在30分钟内T7 RiboMAX™ 直达系统生产毫克量的RNA,而不象其它商业试剂盒需要2—4小时。
● 方便:四种rNTP和2x转录缓冲液已经混合好,这样减少了移液误差和2x转录缓冲液已经混合好。这样减少了移液误差和实验设置时间。
● 灵活:有效转录各种大小的DNA。可转录短到21bp的转录子。

应用
● 产生大量不加帽转录子,用于体外或体内翻译。
● 体外合成tRNA, rRNA, RNA病毒基因组及RNA酶。
● 生产用于研究RNA剪切、RNA二级结构、反义RNA和RNA:蛋白质相互作用的底物。
● 生产用于非哺乳动物细胞RNA干扰的RNA。

操作指南
技术公告
# TB298

储存条件:存于-20℃。

 

Riboprobe® 组合系统

 
产品 包装 目录号 价格(元)
Riboprobe® Combination System—T3/T7 RNA Polymerase
一个系统 P1450  
Riboprobe® Combination System—SP6/T7 RNA Polymerase 一个系统 P1460  
 

P1450的组分
1x500u T3 RNA聚合酶
1x500u T7 RNA聚合酶
1x5μg pGEM? 阳性正对照直达模板
1x110u RQ1无RNA酶的DNA酶
2x50μl rATP
2x50μ l rCTP
2x50μl rUTP
2x100μl DTT
1x500μl 优化的5X转录缓冲液
2x1.25ml 无核酸酶水

描述:Riboprobe® 组合系统为以被克隆的DNA插入片段为模板,在体外制备高特异活性的单链RNA探针,或微克量的确定RNA转录子而设计。Riboprobe® 组合系统含有RNA聚合酶以及所有在体外进行转录反应所需要的试剂(除放射性同位素外),还含有RQ1无RNA酶的DNA酶(目录号M6101),以在转录后除去模板。

特点
● 灵活:从一个质粒构造,既可以合成所克隆DNA编码链,也可以合成其非编码链RNA。
● 特异:SP6, T7和T3 RNA聚合酶对启动子非常专一,可以通过质粒DNA模板几乎均一的RNA。
● 方便:含有T7, T3或SP6聚合酶所需的阳性对照DNA模板,还含有用于除去DNA模板的DNA酶I,和RNasin® 核酸酶抑制剂。

应用
● 生产高特异活性的RNA探针。
● 生产微克量的RNA转录子。
● 生产RNA加工底物。
● 生产反义RNA。

 
Riboprobe® 系统
 
产品 包装 目录号 价格(元)
Riboprobe® 系统-SP6
1个系统 P1420  
Riboprobe® 系统-T3 1个系统 P1430  
Riboprobe® 系统-T7 1个系统 P1440  
实验室使用

 

P1420组分
1 x 500u SP6 RNA 聚合酶
1 x 5μg pGEM® 阳性表达对照模板
1 x 110u RQ1无RNase的DNase
1 x 2,500u 重组Rnasin® 核糖核酸酶抑制剂
1 x 50μl rATP
1 x 50μl rCTP
1 x 50μl rGTP
1 x 50μl rUTP
1 x 100μl DTT
1 x 500μl 转录优化5X缓冲液
1 x 1.25ml 无RNase的水

描述: Riboprobe® 系统用于以克隆的DNA插入片段为模板,用体外转录方法制备高特异性的单链RNA探针或微克级的RNA转录本。这些系统包含所有以DNA为模板进行体外转录所需要的成分(除了放射性同位素),以及用于转录后去除模板的RQ1无RNase的DNase (Cat.#M6101)。

特点
●特异性:SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶对启动子极为专一,使用DNA作为模板可以制备均一的RNA。
●酶的选择:系统提供SP6 RNA 聚合酶,T7 RNA 聚合酶或T3 RNA 聚合酶。
●方便:包含用于SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶的阳性对照模板,去除模板的DNase I及重组RNasin® 核糖核酸酶抑制剂。

应用
●高特异性RNA探针的制备。
●微克级RNA转录本的制备。
●RNA加工底物的制备。
●反义RNA的制备。


操作指南
技术公告
#TB016

储存条件:存于-20℃。

 

有关文章
RNA Analysis Notebook BR120
In vitro Transcription Brochure BR102
Neural Notes NN012, NN013, NN014
Promega Notes PN061, PN074

相关产品
RNA 聚合酶
RNA产品系统


Riboprobe® 系统组分及缓冲液
 
产品 包装 浓度 数量 目录号 价格(元)
Riboprobe® 系统缓冲液 1套 —— 1 P1121  
每种单独包装的
rATP, rCTP, rGTP, rUTP
0.5ml 10mM 1 P1221  
可分开提供
RQ1无RNase的DNase 1,000U 1U/μl 1-4
5-19
20+
M6101  
 
 
rATP 0.5ml 10mM 1 P1132  
rCTP 0.5ml 10mM 1 P1142  
rGTP 0.5ml 10mM 1 P1152  
rUTP 0.5ml 10mM 1 P1162  
DTT
分子生物级 100μl 100mM 1 P1171  
转录优化5X缓冲液 200μl —— 1 P1181  
无核酸酶的水 50 ml —— 1-4 P1193  
(2 x 25 ml) —— 5+  
实验室使用

 

P1120组分
1 x 50μl rATP
1 x 50μl rCTP
1 x 50μl rGTP
1 x 50μl rUTP
1 x 200μl 转录优化5X缓冲液
1 x 100μl DTT
1 x 1.25ml 无Nuclease的水

描述:Riboprobe® 系统缓冲液是单独及组合的Riboprobe® 系统组分。也可以单独提供缓冲液。

RQ1无RNase的DNase用于从制备的RNA中去除模板DNA。当需要保持RNA的完整性时,有必要使用RQ1无RNase的DNase。产品经过质量检测以确保其中检测不到RNase活性。包含10X反应缓冲液及10X终止缓冲液。

rATP,rCTP,rGTP及rUTP包装于单独的试管中,适合与Riboprobe® 系统一起使用。rNTP储存于无核酸酶的水中。纯度经过HPLC分析验证。

特点
●提前测试:试剂经过其它Riboprobe® 系统组分rNTP经过体外转录反应的功能性测试。
●转录检验合格:试剂经过使用SP6, T7, 及T3 RNA 聚合酶的体外转录反应检验合格。

操作指南
技术公告
# TM016

储存条件:存于-20℃。

 

Ribo m7G帽子类似物
 
产品 包装 浓度 目录号 价格(元)
Ribo m7G帽子类似物


10 A254单位 40 mM P1711  
25 A254单位 40 mM P1712  
 

描述:Ribo m7G帽子类似物是经过修饰的具有(m7G(5’)G)结构的核糖核酸。甲基化的核糖核酸可以掺入到体外合成转录本的5’末端以刺激7-甲基鸟嘌呤5’帽子结构在大多数真核mRNA上形成。

特点
●提高翻译效率:提高许多基于网织红血球反应的翻译效率。
●高效:阻止RNA在细胞内降解。
●灵活:可用于Riboprobe® 系统或RiboMAX™大量RNA制备系统。

操作指南
Promega产品信息
9PIP171

储存条件:存于-20℃。

有关文章
Promega Notes PN074

相关产品
RiboMAX™大量RNA制备系统-SP6
RiboMAX™大量RNA制备系统-T7
Riboprobe® 组合系统

 

pGEM® 阳性表达对照模板
 
产品 包装 目录号 价格(元)
pGEM® 阳性表达对照模板
10μg
(2 x 5μg)
P2561  
 

描述:pGEM® 阳性表达对照模板是通过用内切酶ScaI将pGEMEX® 载体线形化得到的。当使用Riboprobe®系统时,pGEM® 阳性表达对照模板可用于监测体外转录反应,

特点
●多种大小RNA:SP6 RNA 聚合酶产生1,787及2,566碱基的转录本, T7 RNA 聚合酶产生1,065及2,346碱基的转录本,及T3 RNA 聚合酶产生250及1,525碱基的转录本。
●灵活:可以与SP6,T7,或T3 RNA 聚合酶一同使用。

操作指南
Promega产品信息
9PIP256

储存条件:存于-20℃。

相关产品 页码
Riboprobe® 组合系统 134
Riboprobe® 系统 135


RNA 聚合酶
 
产品 包装 目录号 价格(元)
T7 RNA 聚合酶 1000μ P2075  
5000μ P2077  
10000μ P4074  
T3 RNA 聚合酶 1000μ P2083  
2500μ P4024  
SP6 RNA 聚合酶 1000μ P1085  
5000μ P1081  
2500μ P4084  
 

 

描述:T7,T3及SP6 RNA 聚合酶对与之结合的启动子序列表现出极强的特异性。只有T7,T3或SP6 DNA,或克隆于相应启动子下游的DNA可以作为模板用于T7,T3或SP6 RNA 聚合酶引导的RNA合成。

特点
●特异性:T7,T3或SP6 RNA 聚合酶对T7,T3或SP6启动子序列表现出极强的亲和性及特异性。
●高纯度:通过SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳测定,T7,T3或SP6 RNA 聚合酶的纯度>90% 。无可检测水平的RNase及DNase活性的污染(<1%)。
●使用灵活:可以掺入32P, 33P, 3H及35S核苷酸同位素。
●与5X反应缓冲液一同提供:提供100mM DTT及转录最适5X缓冲液:200mM Tris-HCl(PH 7.9 at 25 oC), 30mM MgCl2, 10mM spermidine, 50mM NaCl。

RNA标准
 
产品 包装 目录号 价格(元)
RNA标准
50μl G3191  
实验室使用。


描述:
Promega公司的RNA标准适合于在乙醛或甲醛-琼脂糖凝胶上判断介于0.28-6.58kb的单链RNA的大小。RNA标准含有9条从特异模板体外合成的RNA阶梯。RNA标准不适合于进行定量分析。电泳后,可以通过溴乙啶染色观察RNA片段。

特点
●推荐的上样量:3μl [用甲醛/MOPs缓冲液制备并使用MOPs电泳缓冲液上样(1)。
●范围(碱基):281-6,583。
●条带数:9。

操作指南
Promega产品信息
9PIG319

储存条件:存于-70℃。