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RNasin核酸酶抑制剂

1.RNasin核酸酶抑制剂是什么?有什么用?
2.RNasin核酸酶抑制剂和重组的RNasin核酸酶抑制剂之间有什么差异?
3.RNasin核酸酶抑制剂如何起作用?
4.RNasin核酸酶抑制剂抑制哪些核酸酶和聚合酶?不抑制哪些酶?
5.RNasin核酸酶抑制剂反应的条件如何?
6.使用RNasin核酸酶抑制剂应避免哪些条件?
7.RNasin核酸酶抑制剂的活力单位如何?
8.动物注射型RNasin核酸酶抑制剂和其它两种RNasin核酸酶抑制剂有何差异?
9.动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于哪些研究?


1. RNasin核酸酶抑制剂是什么?有什么用?
RNasin核酸酶抑制剂是由Promega研究和开发的,具有广谱的RNA酶抑制活力,用于清除RNA酶污染。

2. RNasin核酸酶抑制剂和重组的RNasin核酸酶抑制剂之间有什么差异?
两种酶抑制剂的用途相似。但酶抑制剂的来源不同。
RNasin核酸酶抑制剂最初是从人的胎盘中分离的,目前还在用。重组的RNasin核酸酶抑制剂是由Promega研究的,用它为研究人员提供高质量和稳定的试剂。因为来源于大肠杆菌, 无人DNA的污染,故用途更广。

3. RNasin核酸酶抑制剂如何起作用?
RNasin核酸酶抑制剂是150kD大小的蛋白,它和RNA酶以非共价键按11结合,而抑制RNA酶活力,结合常数为10-14

4. RNasin核酸酶抑制剂抑制哪些核酸酶和聚合酶?不抑制哪些酶?
RNasin核酸酶抑制剂抑制活力如表所示
 
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抑制                                        不抑制

RNaseA                               
  RNaseT1
RNaseB                                 核酸酶S1
RNaseC                                 RNase(
曲霉素)
RNase(
胎盘)                         RNase ONETM 核酸酶
血管生成素
                            Taq DNA聚合酶
                                         
   AMV
M-MLV反转录酶
                                            SP6, T7, T3 RNA聚合酶
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5. RNasin核酸酶抑制剂反应的条件如何?
RNasin核酸酶抑制剂的反应条件为pH5-8(最适pH7-8)

6. 使用RNasin核酸酶抑制剂应避免哪些条件?
简单而言,应避免使RNasin核酸酶抑制剂和RNA酶复合物解聚。应避免使RNasin核酸酶抑制剂失活。具体的因素是温度>50oC, 尿素,SDS,或其他变性剂。

7. RNasin核酸酶抑制剂的活力单位如何?
定义为抑制5ngRNase A水解2`3`-单磷酸环化胞苷的50%的活力所用的抑制剂的量。

8. 动物注射型RNasin核酸酶抑制剂和其它两种RNasin核酸酶抑制剂有何差异?
动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于活体研究。抑制剂中内毒素的活力经处理低于1.0unit/mg蛋白。还提供生理溶液:
1.5mMKH2PO4/8.1mMNa2HPO4/2.7mMKCl/137mMNaCl,pH7.4(37oC)

9. 动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于哪些研究?
动物注射型RNasin核酸酶抑制剂适用于在活体中研究血管生成,因动物注射型RNasin核酸酶抑制剂具有抑制小鼠中血管生成的功能。它和血管中的血管生成素结合,使其丧失促血管再生能力。